癌細(xì)胞有望被“精確殺滅”！中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院顏光美教授課題組10月7日在國(guó)際期刊《美國(guó)科學(xué)院院報(bào)》發(fā)表的研究表明，一種從海南島蚊子身上找到的M1天然病毒，可殺死癌細(xì)胞而不傷害正常細(xì)胞，這種新型溶瘤病毒有望成為新一代抗癌利器。

連日來(lái)，一則科技新聞引起科學(xué)界震動(dòng)，也引發(fā)廣大公眾極大的興趣。M1病毒是如何被發(fā)現(xiàn)的？它對(duì)于腫瘤細(xì)胞的殺滅率有多少？殺滅原理是什么？M1病毒何時(shí)能真正走向臨床？如果變成抗腫瘤藥物，它的價(jià)格貴嗎？帶著一連串疑問(wèn)，近日，南方日?qǐng)?bào)記者走進(jìn)中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院分子神經(jīng)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)室，獨(dú)家采訪(fǎng)了顏光美教授課題組。

一問(wèn) M1病毒是如何被發(fā)現(xiàn)的？

1964年，中山醫(yī)學(xué)院微生物教研室在海南蚊蟲(chóng)上發(fā)現(xiàn)M1病毒。論文作者之一的胡駿在一次實(shí)驗(yàn)中偶然發(fā)現(xiàn)，M1病毒可以將大鼠身上的膠質(zhì)瘤溶解掉

身穿白色大褂、頭戴一副無(wú)框眼鏡，端坐在記者面前的顏光美教授透著學(xué)者的溫文爾雅。圍坐在他身旁的幾位稚氣未脫的年輕人是顏光美教授的博士生、“85后”，也是這篇引發(fā)科學(xué)轟動(dòng)論文的共同作者之一。

“應(yīng)該說(shuō)，我們的相關(guān)研究持續(xù)了10年之久?！鳖伖饷栏锌卣f(shuō)。

“M1病毒最早是1964年中山醫(yī)學(xué)院微生物教研室在海南蚊蟲(chóng)上發(fā)現(xiàn)的?！敝写筢t(yī)學(xué)院藥理學(xué)五年級(jí)博士生林園告訴記者。當(dāng)時(shí)專(zhuān)家研究蚊子蟲(chóng)媒傳播病毒，從庫(kù)蚊中分離得到M1病毒。然而研究發(fā)現(xiàn)，M1病毒對(duì)人不致病，只在馬和豬之間傳播。

也許就是這個(gè)原因，自那之后的40年間，M1病毒并未引起重視。直至2004年，當(dāng)時(shí)正在做博士論文的胡駿在一次實(shí)驗(yàn)中偶然發(fā)現(xiàn)，M1病毒可以將大鼠身上的膠質(zhì)瘤溶解掉。胡駿是論文作者之一，現(xiàn)為中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院微生物教研室副教授。

“自然界相生相克，世界萬(wàn)物都是辯證的，病毒也有好有壞，存在引起癌癥的病毒，也存在能殺死癌癥的病毒?！鳖伖饷勒f(shuō)。其實(shí)，溶瘤效應(yīng)幾十年前就在美國(guó)被發(fā)現(xiàn)，并引起重視，目前發(fā)現(xiàn)的天然病毒中有6種病毒有直接溶瘤作用。美國(guó)現(xiàn)在有兩種溶瘤病毒攜帶GM-CSF基因進(jìn)入了臨床III期試驗(yàn)，抗癌效果很好。

“你去看看，M1病毒除了殺死老鼠癌細(xì)胞，是不是也能殺死人的癌細(xì)胞？”科學(xué)家特有的敏感和好奇，引發(fā)了顏光美一連串的疑問(wèn)?？茖W(xué)更需要嚴(yán)謹(jǐn)求證。胡駿一連進(jìn)行了幾次實(shí)驗(yàn)，答案都是肯定的。

實(shí)驗(yàn)的結(jié)果讓顏光美格外興奮，他也進(jìn)一步提出更大膽的猜想：M1病毒殺死癌細(xì)胞有沒(méi)有特異性和選擇性？

在顏光美指導(dǎo)下，胡駿領(lǐng)下課題，研究新型溶瘤病毒M1在不同組織中的效應(yīng)。胡駿在細(xì)胞上做了幾十次實(shí)驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，M1病毒的選擇性是存在的，它確實(shí)對(duì)正常的細(xì)胞沒(méi)有殺滅作用，只殺滅癌細(xì)胞。2008年，相關(guān)內(nèi)容的第一篇論文發(fā)表。

二問(wèn) M1對(duì)腫瘤細(xì)胞殺滅率如何？

實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，M1病毒對(duì)體外培養(yǎng)的部分人類(lèi)癌癥細(xì)胞抑制率高達(dá)90%；對(duì)腫瘤模型小鼠體內(nèi)的癌細(xì)胞抑制率達(dá)50%—60%；對(duì)臨床敏感病例中切除下來(lái)腫瘤組織的抑制率達(dá)60%—70%

顏光美教授課題組發(fā)表的論文《靶向ZAP基因缺陷的人類(lèi)癌癥細(xì)胞的溶瘤病毒——甲病毒M1的鑒定和描述》顯示，M1病毒能選擇性地感染并殺傷包括肝癌、結(jié)直腸癌、膀胱癌、黑色素瘤在內(nèi)的多種體外培養(yǎng)的癌細(xì)胞，而對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒副作用。值得一提的是，這是課題組的第二篇論文，它的出爐，至少花費(fèi)了3年時(shí)間。

2011年，在中大醫(yī)學(xué)院讀研究生的林園將溶瘤病毒選為主攻方向。他第一次聽(tīng)到溶瘤病毒是在大三的一次文獻(xiàn)閱讀會(huì)上，一個(gè)師姐講解了一篇溶瘤病毒的文章，林園由此萌生了興趣。而大師兄胡駿關(guān)于M1病毒的論文，讓他感到有做下去的希望。

僅有細(xì)胞實(shí)驗(yàn)還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。顏光美提出，還要做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，并盡可能拓展腫瘤組織的種類(lèi)。隨后，課題組從近70種癌細(xì)胞中篩選出12種常見(jiàn)的癌種，包括全球病發(fā)率最高的肝癌、腸癌、膀胱癌、腦癌等10大癌癥，以及膠質(zhì)瘤和廣東地區(qū)高發(fā)的鼻咽癌。

每個(gè)癌種選5株腫瘤細(xì)胞系，實(shí)驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)M1病毒溶瘤效應(yīng)明顯。第一個(gè)突破點(diǎn)在2012年春天到來(lái)：在歷時(shí)大半年的小鼠和大鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)上，課題組發(fā)現(xiàn)，M1病毒可以有效抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，M1病毒對(duì)體外培養(yǎng)的部分人類(lèi)癌癥細(xì)胞，抑制率高達(dá)90%；對(duì)腫瘤模型小鼠體內(nèi)的癌細(xì)胞，抑制率達(dá)50%—60%。他們還對(duì)臨床病例中切除下來(lái)的腫瘤組織進(jìn)行離體活組織培養(yǎng)并用M1病毒處理，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，對(duì)敏感病例的癌組織的抑制率達(dá)60%—70%。

更讓林園和小伙伴們開(kāi)心的是，小鼠體重沒(méi)有減輕，證明對(duì)正常細(xì)胞沒(méi)有殺傷，而且在對(duì)小鼠體檢，包括血常規(guī)、體重、飲食等指標(biāo)檢查后，都沒(méi)有發(fā)現(xiàn)明顯的病變，對(duì)小鼠器官進(jìn)行病理切片也沒(méi)有發(fā)現(xiàn)異常。“這證明M1病毒對(duì)正常細(xì)胞沒(méi)有傷害?！闭撐淖髡咧?、中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士后張海鵬興奮地說(shuō)。

三問(wèn) “精確殺滅”原理是什么？

M1病毒能夠選擇性識(shí)別并殺死癌細(xì)胞的原因，就在于其對(duì)ZAP缺失的識(shí)別，人類(lèi)癌癥廣泛缺乏ZAP蛋白。而正常細(xì)胞是健全的，有一道防線(xiàn)，病毒無(wú)法攻陷

正當(dāng)課題組信心滿(mǎn)滿(mǎn)地準(zhǔn)備向?qū)W術(shù)界公布這一科學(xué)發(fā)現(xiàn)時(shí)，國(guó)際同行提出了質(zhì)疑。一次國(guó)際學(xué)術(shù)會(huì)議上，美國(guó)芝加哥大學(xué)教授伯納德·羅依茲曼提出尖銳的問(wèn)題：M1病毒精準(zhǔn)殺滅的原理是什么？伯納德·羅依茲是世界知名的分子病毒專(zhuān)家，也是美國(guó)科學(xué)院院士、中國(guó)工程院外籍院士，他的疑問(wèn)無(wú)疑代表了國(guó)際學(xué)術(shù)界的主流意見(jiàn)。

“就好像是導(dǎo)彈發(fā)射，M1病毒‘導(dǎo)彈’可以實(shí)現(xiàn)精確制導(dǎo)，它的爆炸系統(tǒng)是怎么爆炸的？原理是TNT還是核彈？”林園告訴記者，事實(shí)上，這也是課題組遇到的最大難題：為什么M1病毒的殺傷效應(yīng)是靶向的？它又是如何殺傷、如何發(fā)揮溶瘤效應(yīng)的？

而機(jī)制研究正是科學(xué)研究中最難的一關(guān)。

事實(shí)上，從細(xì)胞株篩選開(kāi)始，課題組就著手機(jī)制研究，試圖找到破解M1病毒之謎的“鑰匙”，但相當(dāng)長(zhǎng)時(shí)間里一直沒(méi)有突破。

最艱難的時(shí)刻誰(shuí)也不愿意放棄?？恐鴪F(tuán)隊(duì)合作精神，經(jīng)過(guò)一年多無(wú)數(shù)次的試錯(cuò)，課題組終于在2013年上半年迎來(lái)了轉(zhuǎn)機(jī)。通過(guò)實(shí)驗(yàn)，課題組發(fā)現(xiàn)，對(duì)腫瘤細(xì)胞株殺傷越明顯的細(xì)胞中，病毒復(fù)制就越快、產(chǎn)量越高。“這就告訴我們，正常細(xì)胞也就是不敏感細(xì)胞中一定有抑制病毒的因素，不會(huì)有殺傷的作用?！绷謭@說(shuō)。

于是，大家開(kāi)始著眼尋找抗病毒因子。然而，尋找到ZAP抗病毒因子的歷程也是一波三折。

關(guān)于抗病毒因子，科學(xué)界已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了千千萬(wàn)萬(wàn)種，要找到抑制M1病毒的抗病毒因子，無(wú)疑是大海撈針。

“現(xiàn)在是大數(shù)據(jù)的時(shí)代，不妨采用一步步縮小的方式來(lái)找?！泵悦Ｖ?，顏光美提出新的思路。為此，課題組采用了最新的基因芯片技術(shù)，從人類(lèi)整個(gè)基因組所有2萬(wàn)—3萬(wàn)個(gè)基因的表達(dá)量中尋找差異，經(jīng)過(guò)逐一排除后剩下了56個(gè)候選基因，再對(duì)56個(gè)基因進(jìn)行小規(guī)模的RNA干擾實(shí)驗(yàn)，最后終于發(fā)現(xiàn)，“鋅指抗病毒蛋白”（ZAP）的效應(yīng)是最明顯的。這意味著，M1病毒能夠選擇性識(shí)別并殺死癌細(xì)胞的原因，就在于其對(duì)ZAP缺失的識(shí)別，而人類(lèi)癌癥廣泛缺乏ZAP蛋白。

“這就剛好解釋了病毒為什么能殺傷表達(dá)低或表達(dá)缺失的細(xì)胞。因?yàn)槟[瘤細(xì)胞在突變過(guò)程中，往往它的免疫通絡(luò)有部分缺失和缺陷，剛好溶瘤病毒利用這種缺陷將其殺死，但正常細(xì)胞是健全的，有一道防線(xiàn)，病毒無(wú)法攻陷，一旦有外敵入侵，就把病毒殺死”。

M1病毒選擇性感染并殺死癌細(xì)胞的謎題終于被解開(kāi)。

四問(wèn) M1病毒臨床前景如何？

目前研究已完成實(shí)驗(yàn)室階段，將爭(zhēng)取用3年左右時(shí)間完成臨床前階段的研究工作，取得一期臨床試驗(yàn)的許可證，此時(shí)，M1病毒才能用于自愿參與試驗(yàn)的患者身上

課題組進(jìn)一步研究顯示，69%肝癌組織、52%結(jié)腸癌組織、61%的膀胱癌組織表現(xiàn)出ZAP的低水平。這意味著，若新藥成功研發(fā)，病人可以先通過(guò)檢測(cè)，確定體內(nèi)癌細(xì)胞缺乏ZAP，便可以進(jìn)行病毒溶瘤治療，提高有效的可能性。

“這一發(fā)現(xiàn)為精準(zhǔn)的臨床用藥和實(shí)施個(gè)體化療法提供了可靠的科學(xué)依據(jù)，也會(huì)極大地增加未來(lái)臨床試驗(yàn)取得成功的機(jī)會(huì)?！鳖伖饷勒f(shuō)。

但新聞媒體報(bào)道后，一些社會(huì)公眾盲目樂(lè)觀(guān)，很多癌癥病患家屬甚至致電顏光美，想將M1病毒馬上用在病人身上。但顏光美表示，目前M1病毒距離真正臨床實(shí)驗(yàn)還有很長(zhǎng)距離，“該藥研發(fā)還處于科學(xué)研究階段（包括動(dòng)物研究），離臨床藥檢還有很漫長(zhǎng)的時(shí)間，按照中國(guó)目前的法律，利用人體進(jìn)行藥物研究是違法的”。

“我們現(xiàn)在已經(jīng)完成實(shí)驗(yàn)室階段，有充足的研究資源和好的研究條件，爭(zhēng)取用3年左右時(shí)間完成臨床前階段的研究工作，取得一期臨床試驗(yàn)的許可證，M1病毒便能用于自愿參與試驗(yàn)的患者身上，這是理想情況下最快能用于人體上的時(shí)間了?！鳖伖饷勒f(shuō)。

顏光美介紹，目前課題組正準(zhǔn)備在靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物身上做實(shí)驗(yàn)，為正式申請(qǐng)臨床實(shí)驗(yàn)做準(zhǔn)備。

“研究的最終目的是想做成產(chǎn)品，真正發(fā)揮抗癌效果?！鳖伖饷肋€透露一個(gè)更振奮人心的消息：課題組還在著手做溶瘤病毒的增效劑研究，研究如何充分發(fā)揮病毒的溶瘤效應(yīng)，增強(qiáng)病毒的殺傷效果。“正常病毒注射到人體內(nèi)，一般7天就會(huì)被人體的免疫系統(tǒng)清除干凈，再注射就會(huì)產(chǎn)生免疫反應(yīng)。如果增效劑研究成功，將大大減少M(fèi)1病毒的使用劑量，降低藥品的潛在風(fēng)險(xiǎn)、毒副作用和制造成本，大大減輕病人的經(jīng)濟(jì)壓力”。

■ 小知識(shí)

1. 惡性腫瘤

惡性腫瘤是當(dāng)今世界嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康的疾病，也是人類(lèi)生命的主要“殺手”之一。傳統(tǒng)的放、化療及手術(shù)治療存在抗腫瘤能力低、殺傷指數(shù)過(guò)小、副作用大、極易復(fù)發(fā)等缺點(diǎn)。因此，開(kāi)發(fā)安全高效的生物治療方法已成為腫瘤治療領(lǐng)域關(guān)注的熱點(diǎn)。

2. 溶瘤病毒

溶瘤病毒是一類(lèi)具有復(fù)制能力的腫瘤殺傷型病毒。目前，科學(xué)界存在兩類(lèi)抗腫瘤病毒，一類(lèi)是天然對(duì)于腫瘤細(xì)胞具有特異性感染或殺傷能力的病毒，另一類(lèi)是經(jīng)過(guò)人為改造對(duì)于腫瘤細(xì)胞具有特異殺傷能力的病毒。

據(jù)悉，世界上最早出現(xiàn)溶瘤病毒的報(bào)道出現(xiàn)在上世紀(jì)50年代，當(dāng)時(shí)發(fā)現(xiàn)一名子宮頸癌患者在感染狂犬病病毒后，腫瘤隨之消退。

近幾十年來(lái)，溶瘤病毒治療引起了廣泛關(guān)注，相關(guān)研究取得了巨大進(jìn)展。

1991年，國(guó)外科學(xué)家Martuza RL等人在國(guó)際期刊《自然》發(fā)表文章，報(bào)道他們構(gòu)建的敲除TK（thymidine kinase）基因的神經(jīng)毒性減弱的溶瘤單純皰疹病毒（HSV-1），在惡性膠質(zhì)瘤治療中有一定的療效，成為現(xiàn)代溶瘤病毒治療的開(kāi)端。

2005年11月，溶瘤病毒H101經(jīng)過(guò)中國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局審批投入臨床，用于治療難治性晚期鼻咽癌，是世界上第一個(gè)由官方批準(zhǔn)的溶瘤病毒藥物。

原文鏈接：http://epaper.southcn.com/nfdaily/html/2014-10/18/content_7360503.htm