中大新聞網(wǎng)訊（通訊員梁思佳）近日，中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院梁思佳副教授、周家國(guó)教授和中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院區(qū)景松教授團(tuán)隊(duì)合作在巨噬細(xì)胞泡沫化和動(dòng)脈粥樣硬化研究中取得進(jìn)展。該研究結(jié)果發(fā)表在心血管研究權(quán)威期刊European Heart Journal上。該研究揭示了巨噬細(xì)胞NFATc3（活化T細(xì)胞核因子c3）通過(guò)上調(diào)miRNA-204抑制動(dòng)脈粥樣硬化形成的作用機(jī)理，發(fā)現(xiàn)胞漿miRNA-204-5p靶向抑制SR-A，胞核miRNA-204-3p靶向抑制CD36，兩者共同抑制巨噬細(xì)胞泡沫化和動(dòng)脈粥樣硬化。
動(dòng)脈粥樣硬化是一種炎癥反應(yīng)啟動(dòng)的脂質(zhì)沉積性疾病，是多種心腦血管疾病的共同病理基礎(chǔ)，由其所致的腦卒中，冠心病及心肌梗死等心腦血管事件嚴(yán)重危害人類(lèi)健康。深入探討動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制，尋找新防治靶點(diǎn)，對(duì)治療動(dòng)脈粥樣硬化性心腦血管疾病具有重要的科學(xué)意義和價(jià)值。
該研究發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中巨噬細(xì)胞核中NFATc3表達(dá)降低。同時(shí)，循環(huán)外周血單核細(xì)胞中的 NFATc3 水平與動(dòng)脈粥樣硬化患者的疾病嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)。通過(guò)在體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，巨噬細(xì)胞特異性敲除NFATc3可促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展，過(guò)表達(dá)NFATc3則抑制動(dòng)脈粥樣硬化形成，但并不影響血脂水平。機(jī)制分析發(fā)現(xiàn)NFATc3主要通過(guò)抑制清道夫受體SR-A和CD36的表達(dá)，進(jìn)而抑制巨噬細(xì)胞的脂質(zhì)沉積和泡沫化。有趣的是，NFATc3作為轉(zhuǎn)錄因子并不直接與SR-A和CD36基因啟動(dòng)子區(qū)結(jié)合調(diào)控其表達(dá)。鑒于miRNA能抑制靶基因的表達(dá)，研究者推測(cè)NFATc3可能通過(guò)調(diào)控miRNA表達(dá)抑制SR-A和CD36的水平。通過(guò)多組學(xué)綜合分析發(fā)現(xiàn)NFATc3能夠明顯上調(diào)miR-204-5p和miR-204-3p的表達(dá)。通過(guò)熒光素酶實(shí)驗(yàn)和啟動(dòng)子序列缺失實(shí)驗(yàn)分析檢測(cè)到NFATc3結(jié)合在miR-204基因進(jìn)化保守位點(diǎn)上游-1.5 kb處，并靶向調(diào)節(jié)miR-204的轉(zhuǎn)錄，且miR-204能抑制巨噬細(xì)胞的脂質(zhì)沉積和泡沫化。
pre-miR-204經(jīng)過(guò)剪切能形成miR-204-3p和miR-204-5p兩個(gè)成熟體，一方面，miR-204-5p通過(guò)經(jīng)典途徑在胞漿靶向SR-A 3’-UTR抑制SR-A的表達(dá)。另一方面，通過(guò)ChIP-seq/ChIP-PCR/RIP等技術(shù)發(fā)現(xiàn)miR-204-3p在細(xì)胞核通過(guò)抑制Ago2蛋白和組蛋白H3K27ac、H3K4me3在CD36啟動(dòng)子上的富集從而參與CD36的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。該研究還利用Crispr/cas9基因編輯技術(shù)突變NFATc3在miR-204啟動(dòng)子上的結(jié)合位點(diǎn)，再次證實(shí)miR-204介導(dǎo)了NFATc3對(duì)于SR-A和CD36的抑制作用。此外，在體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明巨噬細(xì)胞過(guò)表達(dá)miR-204-5p和miR-204-3p能明顯抑制NFATc3敲除對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的促進(jìn)作用。
該研究首次提供了巨噬細(xì)胞 NFATc3 是動(dòng)脈粥樣硬化重要抑制分子的直接證據(jù)，表明 NFATc3/miR-204軸是治療動(dòng)脈粥樣硬化的新靶點(diǎn)。此外，目前臨床上常用的免疫抑制劑環(huán)孢素A和他克莫司通過(guò)特異性抑制 Calcineurin-NFAT通路活化，從而抑制器官移植后的免疫排斥反應(yīng)。但免疫抑制劑長(zhǎng)期應(yīng)用后發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化不良反應(yīng)阻礙了該類(lèi)藥物的臨床應(yīng)用，該研究結(jié)果表明，抑制Calcineurin-NFAT 信號(hào)可能是該類(lèi)免疫抑制劑致動(dòng)脈粥樣硬化作用的分子基礎(chǔ)。
單核/巨噬細(xì)胞NFATc3抑制泡沫細(xì)胞形成和動(dòng)脈粥樣硬化分子機(jī)制模式圖
該工作受到國(guó)際同行的高度關(guān)注，European Heart Journal同期邀請(qǐng)了動(dòng)脈硬化研究領(lǐng)域著名學(xué)者紐約大學(xué)的Kathryn J. Moore教授對(duì)該研究成果發(fā)表了評(píng)論，Kathryn J. Moore教授在評(píng)論中進(jìn)一步肯定了NFATc3 作為治療動(dòng)脈粥樣硬化潛在治療靶點(diǎn)的重要性（詳見(jiàn)https://doi.org/10.1093/eurheartj/ehab640）。
中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院梁思佳副教授、周家國(guó)教授和中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院區(qū)景松教授為該論文的通訊作者，中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院博士研究生劉秀，郭家偉，林曉純等為論文的第一作者，該研究受到國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目和面上項(xiàng)目的支持。
